Kristne ikke-katolikker og personer som tilhører andre religioner kan ikke bli medlemmer i Prelaturet, men de kan bli medarbeidere. Medarbeiderne ber for Opus Dei og tar del i den ideelle virksomheten av formasjonsmessig eller sosial art som medlemmene utfører i hele verden, gjennom sitt arbeid og økonomiske bidrag. Det finnes for tiden medarbeidere i Opus Dei som er ortodokse kristne, anglikanere, lutheranere og til og med jøder, muslimer, buddhister og dessuten mennesker som ikke bekjenner seg til noen religion.