Os cristãos não católicos e as pessoas de outras religiões não podem pertencer à Prelatura, mas podem cooperar com o Opus Dei, se assim o desejarem. Os cooperadores rezam pelo Opus Dei e colaboram – com trabalho e esmola –nas tarefas educativas e assistenciais promovidas por fiéis da Prelatura em todo o mundo. Actualmente, são cooperadores do Opus Dei cristãos ortodoxos, anglicanos, luteranos, bem como judeus, muçulmanos, budistas e também pessoas que não professam qualquer religião.